为什么要使用 Sulfazyme™ PaS

市面上大多数硫酸酯酶来源于蜗牛、帽贝或鲍鱼等生物，这些生物可能含有干扰代谢物和酶活性，从而导致结果不准确。Sulfazyme™ PaS 为重组酶，纯度 >90%。该酶已被证实仅具有硫酸酯酶活性，确保高度特异性和准确的水解。

图 1.显色法检测磺胺类固醇酶和粗制蜗牛酶（Helix pomatia）的相对活性。（a） 25°C 下使用酚酞葡萄糖醛酸苷测定葡萄糖醛酸酶活性。（b） 37°C 下使用对硝基儿茶酚硫酸盐测定硫酸酯酶活性。（c） 37°C 下使用钙黄绿素-AM 测定酯酶活性。相对活性通过对最低活性进行标准化确定。[摘自 Sitasuwan N、McGee A、Lee LA。（2019 年）。使用纯化的硫酸酯酶水解硫酸化类固醇、毒性内生菌和外来菌，以定量分析硫酸化和非结合化合物。第 67 届美国质谱学会质谱及相关主题会议论文集，佐治亚州亚特兰大。2019 年 6 月 2 日至 6 日。]

图2.已知浓度的硫酸化代谢物在长达24小时内的水解曲线。（a）合成尿液（Surine™）与磺胺酶孵育后的硫酸皮质醇。（b）合成尿液（Surine™）与磺胺酶孵育后的硫酸他喷他多。（c）人血浆中与磺胺酶孵育后的硫酸他喷他多。[摘自Sitasuwan N、McGee A和Lee LA。（2019年）。使用纯化的硫酸酯酶水解硫酸化类固醇、毒性内生菌和外来化合物，以定量分析硫酸化和非结合化合物。第67届美国质谱学会（ASMS）质谱及相关主题会议论文集，佐治亚州亚特兰大。2019年6月2日至6日。]

另一项研究比较了三种酶水解人尿液样本中特布他林代谢物的解离效率。将IMCSzyme®和Sulfazyme™ PaS（本文中称为IMCS-PSF）与Helix pomatia β-葡萄糖醛酸酶（Sigma）进行了比较。在健康志愿者口服特布他林片剂前后采集尿液样本。样品分别在四种酶和样品混合条件下进行处理（表1）。该研究表明，Sulfazyme™ PaS比其他常用于分析特布他林的酶具有更高的水解效率（图3）。

图 3.特布他林代谢物在无酶、IMCSZyme、IMCS-PSF（磺胺酶 PaS）和粗酶条件下的水解时间曲线比较。数据以平均值±标准差 (n = 3) 表示。***p ≤ 0.001 基于方差分析。ANOVA：方差分析；SD：标准差。[引自 Wang FR, Fei J, Yu XL, Zhao XC, Wang Q, Metavarayuth K. (2018). Advancing the Analysis of Terbutaline in Urine Samples Using Novel Enzyme Hydrolysis. Bioanalysis. doi: 10.4155/bio-2018-0145.]

与IMCSzyme®结合使用时，Sulfazyme 可以更快、更有效地发现结合代谢物，而这些代谢物很难通过质谱法检测到。

结合使用IMCSzyme和Sulfazyme PaS，可以快速检测尿液中的苯基-γ-戊内酯 (PVL)。传统方法需要6小时，而使用IMCSzyme和Sulfazyme酶的组合水解只需30分钟。